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抗體(Ig)是由抗原刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)后產(chǎn)生,并能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)??贵w具有空間結(jié)構(gòu),也具有抗原決定簇,還可被其他蛋白(如二抗)結(jié)合。
2、抗原抗體的一些蛋白質(zhì)性質(zhì)
抗原和抗體均屬于蛋白質(zhì);
蛋白質(zhì)之間存在相互作用,抗原和抗體的結(jié)合本質(zhì)上屬于蛋白質(zhì)的相互作用;
所有的蛋白都具有空間結(jié)構(gòu);
任何蛋白質(zhì)均是一種抗原,抗原和抗體是相對(duì)的概念。
〖 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)) 〗
1、ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn))的介紹
ELISA是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,它將抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)與酶反應(yīng)的敏感性相結(jié)合,在抗原抗體結(jié)合的過程中通過在抗原或抗體上標(biāo)記酶,酶和底物的結(jié)合使反應(yīng)液吸光值發(fā)生改變,吸光值可被機(jī)器識(shí)別,機(jī)器將吸光值的變化經(jīng)公式轉(zhuǎn)化為數(shù)字信號(hào),ELISA被廣泛應(yīng)用在液體樣本中的病原、抗體、激素等有機(jī)物質(zhì)的測(cè)定中。
2、ELISA的分類
3、ELISA的原理
它采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于定量測(cè)定。測(cè)定的對(duì)象可以是抗體也可以是抗原。
在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑)
②酶標(biāo)記的抗原或抗體(標(biāo)記物)
③酶作用的底物(顯色劑)
利用ELISA測(cè)量時(shí),抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,免疫活性保留,加入一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),此偶聯(lián)物也保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)二者反應(yīng)結(jié)合后,被酶催化水解或氧化還原而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測(cè)的抗原(抗體)含量成正比。 生成產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)(酶標(biāo)儀)加以測(cè)定,簡(jiǎn)單迅速,特異性強(qiáng)。
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